MyCoses के प्रयोगशाला निदान। मानव पैथोलॉजी में फंगल संक्रमण की भूमिका

2. पैथोलॉजिकल सामग्री का प्रयोगशाला अध्ययन

2.1। माइक्रोस्कोपिक अनुसंधान

मशरूम के रूपरेखा तत्वों का पता लगाने के लिए - खमीर कोशिकाओं, स्यूडोमाइसेलियम, माईसेलियम, सम्मेलन सीटें, शॉनिडियम, गहरी माइकोस के ऊतक रूपों - रोगजनक सामग्री की देशी और चित्रित दवाओं में जांच की जाती है।

तरल रोगजनक सामग्री को एक अनपेक्षित राज्य में निम्नलिखित प्रबुद्ध तरल पदार्थ में देखा जाता है: ग्लिसरीन (एथिल अल्कोहल 1 एच, ग्लिसरीन 2 एच, आसुत जल 2 एच) के साथ अल्कोहल का मिश्रण, लूगोल समाधान (क्रिस्टलीय आयोडीन का 1 ग्राम, 2 ग्राम पोटेशियम आयोडाइड, 150 मिलीलीटर पानी), साथ ही साथ पानी या शारीरिक समाधान में। विषय ग्लास पर मूल दवाओं की तैयारी के लिए, लूप या पिपेट को सामग्री की एक बूंद के साथ लागू किया जाता है, फिर प्रबुद्ध तरल की 1-2 बूंदें, 1:80 (ऐपिस (ऐपिस) की छोटी वृद्धि के साथ कोटिंग ग्लास और माइक्रोस्कोपी के साथ कवर की जाती हैं। 10x और लेंस 8x), जिस पर आप खमीर कोशिकाओं, स्यूडोमायती, माईसेलियम और मशरूम के अन्य तत्वों के क्लस्टर देख सकते हैं। 1: 400 में बड़ी वृद्धि के साथ, व्यक्तिगत कोशिकाओं को विशेषता दी जा सकती है।

घने रोगजनक सामग्री (त्वचा, नाखून फ्लेक्स) को 10-20% कॉन पाउडर की बूंद में रखा जाता है, जब तक कि क्षार क्रिस्टल बूंद की परिधि पर दिखाई नहीं देते हैं, तब तक बर्नर की लौ (बेहतर मैक्रेशन के लिए) की लौ के ऊपर थोड़ा गरम किया जाता है। फिर ड्रॉप कोटिंग ग्लास से ढकी हुई है, इसे थोड़ा दबाया गया है और माइक्रोस्कोपी, पहले तराजू खोजने के लिए एक छोटी वृद्धि के तहत, फिर बड़े आवर्धन के साथ।

आस-पास के विवाद (एक्टोट्रिक्स) या बालों के अंदर या हेयर (एंडोट्रिक्स) के अंदर के बाल से सामग्री में, कवक तत्व आमतौर पर बहुत स्पष्ट रूप से दिखाई देते हैं। बालों के घाव, विवाद के आकार की तरह, के लिए विशिष्ट हैं विभिन्न जीव त्वचीय। मशरूम संरचनाओं और कलाकृतियों के बीच विभेदक निदान आवश्यक है। झूठे सकारात्मक परिणामों के संभावित स्रोत लिपिड बूंदें, वायु बुलबुले, कपड़ा फाइबर और तथाकथित "मोज़ेक मशरूम" हैं। लिपिड बूंद खमीर कोशिकाओं के समान हो सकती हैं - ऐसे पते खराब रूप से प्रबुद्ध सामग्री में सबसे अधिक बार होते हैं। कपड़ा फाइबर आमतौर पर एपिडर्मिस, बालों या नाखून सामग्री से अलग से झूठ बोलते हैं। वे कवक के gifs, असमान मोटाई से बड़े हैं और SEPT नहीं है। "मोज़ेक कवक" एक आर्टिफैक्ट है जो दवाओं के अत्यधिक हीटिंग के साथ कोव के क्रिस्टलाइजेशन की प्रक्रिया में प्राप्त किया जाता है। मशरूम के विपरीत, कोशिकाओं पर स्पष्ट अलगाव निर्धारित नहीं होते हैं।

फंगल संक्रमण के निदान में एक महत्वपूर्ण कदम चित्रित दवाओं की तैयारी है। किसी भी रोगजनक सामग्री (धुंधला दवाओं, जीवों, केन्द्रापसारकों और, ज़ाहिर है, हिस्टोलॉजिकल सेक्शन) को तीन मुख्य प्रकार के प्रसंस्करण पास करना होगा: 1) सही मशरूम की पहचान करने के लिए पीएएस-विधि रंग - यूयूटर्स; 2) ग्राम-रेगर द्वारा ग्राम-रेगर द्वारा संशोधनों के अनुसार रंगीन, भूरे-ब्रेना के अनुसार, भूरे रंग के ब्रेन्ना - एक्टिनोमाइस और नोकर्डियम की पहचान करने के लिए संयोगजनक जीवाणु माइक्रोबायोट्स की पहचान करने के लिए; 3) सिलोन विधि द्वारा सिलोन-नीलसन या संशोधन की विधि के अनुसार रंग - एसिड प्रतिरोधी सूक्ष्मजीवों की पहचान करने के लिए, सबसे पहले, माइकोबैक्टेरियम के साथ तपेदिक के साथ तपेदिक के साथ संकेत और भिन्नता के लिए, कुष्ठ रोगियों के रोगजनकों का पता लगाने के लिए, कुष्ठ रोगियों और खमीर के रोगजनकों का पता लगाने के लिए।

पीएएस-विधि (शिफ-आयोडीन एसिड) में सूक्ष्मजीवों की दीवारों में तटस्थ polysaccharides की पहचान शामिल है। अधिकांश ईमिट्ज़ेट की दीवारों में, एक या एक और एकाग्रता में एक ग्लुकन-मानान परिसर होता है, जिसके कारण धुंधला होता है।

प्रोकैरियोट्स (बैक्टीरिया) आरएएस-नकारात्मक हैं, जिनमें मिकोग्सा एक्टिनोमाइसेस और नोकार्डिया में रूचि है। हालांकि, एक्टिनोमिकिक दोस्तों के गठन में, तथाकथित "सीमेंट" का गठन किया जाता है, एक वनस्पति एक्टिनोमाइकोटिक मायसेलियम को ग्रेन्युल में ग्लू करना, जो आरएएस पॉजिटिव रंग भी देता है। जिसके संबंध में यह विधि लागू है और एक्टिनोमाइकोसिस के निदान में।

आरएएस प्रतिक्रिया (और इसके संशोधन) फंगल संक्रमण के ऊतक रूपों का निदान करने का सबसे महत्वपूर्ण तरीका है। विधि आयोडीन या क्रोमिक एसिड द्वारा कार्बोहाइड्रेट के ग्लाइकोलिक समूह के ऑक्सीकरण पर आधारित है। आयोडीन एसिड Aldehyde में 1.2 और 1.4 ग्लाइकोल ऑक्सीकरण करता है और कार्बन परमाणुओं के हाइड्रोक्साइल समूहों के बीच बंधन को डिस्कनेक्ट करता है। Aldehyde समूहों का पता लगाया जा सकता है और शिफ के Aldehyde अभिकर्मक की मदद से। मशरूम की दीवारों में सीटू में एक बैंगनी-लाल रंग (तकनीक - अनुप्रयोगों) में हेटरोपोलिसाक्राइड कॉम्प्लेक्स का गहन धुंधला होता है।

आसपास के ऊतकों के रंग को दबाने के लिए, उपचार ("काउंटर-प्रोसेसिंग") हल्का हरा, मेथनिल पीला, और जैसे लागू होते हैं। इस मामले में, केवल मशरूम कोशिकाओं का पता चला है, जो ऊतकों या स्मीयर में कारक एजेंट के संकेत के चरण में बहुत उपयोगी है। साथ ही, इस तरह की तैयारी पर ऊतकों के जीव और परिवर्तन की प्रतिक्रिया प्रतिक्रिया का न्याय करना संभव नहीं है। डॉक्टरेट हेमेटोक्सिलिन के साथ आरएएस-विधि द्वारा चित्रित समानांतर तैयारी करना हमेशा आवश्यक होता है।

व्यावहारिक रूप से, न केवल आरएएस विधि का उपयोग शास्त्रीय संस्करण में किया जाता है, बल्कि इसके विभिन्न संशोधनों में भी: क्रोमियम एसिड (आयोडीन के बजाय) का ऑक्सीकरण बाउर प्रतिक्रिया है, ग्रिडली के अनुसार चित्रकारी, गोमोरी के अनुसार होमोरिनिसिस विधि का प्रजनन -ग्रोट विधि। उन सभी को मशरूम के ऊतक रूपों का पता लगाने के लिए सफलतापूर्वक उपयोग किया जाता है, और वे एक ही सिद्धांत (तकनीक - एपोसिशन देखें) पर आधारित होते हैं। टेबल तीन।

टेबल तीन।

फैब्रिक मशरूम के टिनिनिटोरियल गुण

(पैथोलॉजिकल सामग्री में, हिस्टोलॉजिकल सेक्शन में)

अवसरवादी मायोस	पहचान के तरीके
कैंडिडाइसिस	ग्रिडली द्वारा रस या पेंटिंग
Aspergillez	हेमेटोकसिलिन और ईसीन, होमोरी ग्रोट के लिए छापे
ज़िगोमिकोसिस	हेमेटोकसिलिन और ईओसिन
क्रिप्टोक्कोसिस	अल्कियाना ब्लू (मुरुरी विधि के अनुसार) + आरएएस-प्रतिक्रिया + हेमेटॉक्सिलिन
पनीमोसिस्टोसिस	बाउर की विधि के अनुसार रंग, होमोरी ग्रॉस, रंग tionine द्वारा Impregnation
फुसीरोसिस	Romanovsky Gimsi की विधि के अनुसार, राइट की विधि द्वारा
Soporioz
ट्राइकोस्पोरोसिस	Hematoksilin और Eosin, Romanovsky-gimse की विधि के अनुसार चित्रकारी
Feogiphomycosis और क्रोमोमिकोसिस	हेमेटोकसिलिन और ईओसिन
प्राथमिक रोगजनक प्रोजेस:	पहचान के तरीके
Coodioioidosis	RAS -RUCTION + हेमेटोकसिलिन
हिस्टोप्लाज्मोसिस	होलोरी-ग्रोकॉट पर छापे, बाउर की विधि से चित्रकारी, रोमनोवस्की-गिने की विधि से चित्रकारी
उत्तरी अमेरिकी ब्लास्टोमिकोसिस
पेरैक्काइडियोडोसिस	रास-प्रतिक्रिया, गोमोरी ग्रोथ के लिए प्रजनन
Adiaspiromikosis	हेमेटोकसिलिन और ईओसिन, आरएएस प्रतिक्रिया
स्यूडोमाइकोसिस:	पहचान के तरीके
किरणकवकमयता	हेमेटोकसिलिन और ईओसिन, ग्राम-क्रिया के अनुसार रंग
नोकार्डियोसिस	ग्राम की विधि के अनुसार, एक किनोन की विधि के अनुसार, साइल-नील्सन की एक विधि के अनुसार रंग।

"क्रिप्टोकोजोसिस" के निदान की धारणा के तहत, कैप्सूल सामग्री के विशिष्ट पहचान के तरीकों को लागू करने की सलाह दी जाती है Cr.neoformans।Glycosaminoglycans (एसिड polysaccharides) युक्त। इस उद्देश्य के लिए, एल्ज़ियन ब्लू का रंग (मुरुरी विधि के अनुसार) का उपयोग किया जाता है, मुख्य भूरा (सोबिच विधि के अनुसार), एक मुदीगार्मीना रंग। ट्रिपल रंग बहुत उपयोगी है: आरएएस प्रतिक्रिया, फिर एल्ज़ियन ब्लू के साथ उपचार, फिर हेमेटोक्सिलिन। इस मामले में, इसी तरह के रूपरेखा वाले अन्य मशरूम के क्रिप्टोकॉसी और ऊतक रूपों के बीच अंतर करना संभव हो जाता है।

पैथोलॉजिकल सामग्री (हिस्टोलॉजिकल तैयारी) का वर्णन कवक के मोर्फोलॉजी और ऊतक के ऊतक के आकार, उनकी टिंचिविअल विशेषता, मालिक के ऊतकों के लिए रवैया, फागोसाइटोसिस की उपस्थिति, माइक्रोबायोटा के साथ निर्धारित करने के लिए डेटा शामिल है।

2.2। बुवाई रोगजनक सामग्री और खमीर मशरूम के कारण mikoSakh में कोशिकाओं के मात्रात्मक लेखांकन

एंटीफंगल दवाओं की संवेदनशीलता की पहचान और निर्धारित करने के लिए मशरूम की फसलों को प्राप्त करना आवश्यक है।

5-10 मिनट के अध्ययन से पहले गीले बाँझ मोती के साथ हिलाकर homogenized है। यदि स्पुतम में बहुत सारे श्लेष्म होते हैं और खराब रूप से homogenized है, तो 1-2 मिलीलीटर बाँझ नमकीन में जोड़ा जा सकता है। मूल या चित्रित तैयारी में सूक्ष्मदर्शी की स्पूर्यूम। यदि, दृश्य के क्षेत्र में बड़ी वृद्धि के साथ स्पुतम की माइक्रोस्कोपी के दौरान, कवक के तत्व दिखाई दे रहे हैं, तो इसे dilutions में बोया जाना चाहिए 1:10, 1: 100, 1: 1000, अगर कवक के तत्व हैं पता नहीं चला, स्पुतम को पतला नहीं किया जाता है। तरल पोषक तत्व माध्यम (wort, saburo, 1% पेप्टन पानी) या बाँझ नमकीन में dilutions तैयार किए जाते हैं। बुवाई के प्रत्येक कमजोर पड़ने से 0.1 मिलीलीटर सुशो-अग्रर, आगरा सबुरो या एमपीए के 2 कप के लिए एक स्पुतुला के साथ एक स्पुतुला के साथ एंटीबैक्टीरियल एंटीबायोटिक्स - पेनिसिलिन और स्ट्रेप्टोमाइसिन, बायोमाइसिन (माध्यम के 100-200 इकाइयों / एमएल) के साथ। पोषक तत्व माध्यम +37 एस पर थर्मोस्टेट में पूर्व-सूखा है, क्योंकि संघनन की उपस्थिति में, उपनिवेशों के विकास में एक नाली चरित्र हो सकता है। 48 घंटे के लिए + 37 डिग्री सेल्सियस पर थर्मोस्टेट में सेविंग्स से ऊष्मायन होते हैं। फिर, यदि एक ही प्रकार की खमीर उपनिवेशों की वृद्धि, तो वे अपने मात्रात्मक लेखांकन का उत्पादन करते हैं। 1 मिलीलीटर या अध्ययन के तहत सामग्री के 1 ग्राम में खमीर कोशिकाओं (एन) की गणना की गणना सूत्र एन \u003d एबीसी के अनुसार बनाई गई है, जहां एक पेट्री कप पर उपनिवेशों की औसत संख्या है, बी \u003d 10 बीज सामग्री 0.1 मिलीलीटर की मात्रा, प्रजनन excreta की डिग्री (10,100,1000)।

गणना का उदाहरण: कमजोर पड़ने वाले कप पर 1: 1000 औसत 60 उपनिवेशों की वृद्धि हुई, और अध्ययन किए गए excretrum के 1 मिलीलीटर में 60 x 10 x 1000 \u003d 600000 खमीर कोशिकाएं शामिल हैं।

गेंद, ब्रोंची, gaymorh cavities, पित्त (एक सेवा, बी, सी), गैस्ट्रिक रस, duodenal सामग्री, मूत्र को अपकेंद्रित्र ट्यूबों में स्थानांतरित कर दिया जाता है और 10-15 मिनट के लिए centrifuged किया जाता है, जिसके बाद सतह पर तैरनेवाला त्वरित नाली के लिए तरल पदार्थ है आंदोलन। तलछट से माइक्रोस्कोपी के लिए मूल दवाएं तैयार करें। यदि, माइक्रोस्कोपी के दौरान, खमीर कोशिकाएं दृश्य के प्रत्येक क्षेत्र में पाई जाती हैं, तो बीजिंग dilutions 1: 100 और 1: 1000, 0.1 मिलीलीटर प्रति घने पोषक तत्व मीडिया में उत्पादित किया जाता है और 48 घंटे से 37 पर ऊष्मायन किया जाता है। अगर तलछट के माइक्रोस्कोपी के दौरान , खमीर कोशिकाओं का पता नहीं लगाया जाता है, प्रजनन के बिना चुप हो जाता है। खमीर फ्लोरा की मात्रा की गणना रोगजनक सामग्री के 1 मिलीलीटर पर की जाती है।

फैक्ट को 0.2 ग्राम की मात्रा में एक मापनीय चम्मच द्वारा लिया जाता है, इसे 1.8 मिलीलीटर तरल वॉर्ट में रखा जाता है और एक ग्लास स्टिक के साथ पूरी तरह से स्टर्ल किया जाता है। परिणामी प्रजनन (1:10) 5-10 मिनट, 1: 100, 1: 1000 के लिए अनुमानित है और एक agarized माध्यम के साथ 2 कप प्रति 2 कप 0.1 मिलीलीटर की मात्रा में बीज तैयार किया गया है। खमीर फ्लोरा की मात्रा के लिए लेखांकन 1 ग्राम पर उत्पादित किया जाता है।

मस्तिष्कमेरु द्रव। यह इसकी उपस्थिति (पारदर्शी या टर्बिड, रंगहीन या चित्रित, रक्त अशुद्धता की उपस्थिति, precipitate) द्वारा विशेषता है। माइक्रोस्कोफ अपने सेंट्रीफ्यूगेशन के बाद लिकवोर तलछट स्ट्रोक। तीन दवाएं तैयार की जाती हैं: मूल - बाँझ शारीरिक समाधान की एक बूंद में: मूल - शव की एक बूंद में और आरएस-विधि द्वारा पेंटिंग पेंटिंग के लिए स्ट्रोक, ग्राम और अल्टिस ब्लू द्वारा मॉरी में।

माइक्रोस्कोपी मस्तिष्कमेरु द्रव देशी और चित्रित दवाओं में, यह आपको खमीर कड़े कोशिकाओं और मशरूम माईसेलियम के टुकड़े, या बैक्टीरिया की उपस्थिति स्थापित करने की अनुमति देता है, जिससे purulent meningitis (मेनिंगोकोकस, न्यूमोकोकस, हेमोफिलिक चॉपस्टिक, आदि)। कैप्सूल मशरूम को एक स्ट्यूड तैयारी में प्रकट किया जा सकता है क्रिप्टोकोकस नियोफॉर्मन्स। साथ ही, शवों की एक भूरे रंग की पृष्ठभूमि पर, मजाकिया खमीर कोशिकाएं कैप्सूल के हल्के हेलो से घिरे दिखाई देती हैं। खमीर आकार भी ट्यूबों में हो सकता है कैनडीडा अल्बिकन्सपिंजरे के चारों ओर एक हल्का हेलो कैप्सूल नहीं है।

सीआर। Neoformans। इसे एल्ज़ियन ब्लू (एमओआरआई में) के रंग का उपयोग करके भी पता लगाया जा सकता है। रंग कैप्सूल heteropolysaccharide विशेषता के चुनिंदा पहचान के कारण होता है Cr.neoformans।। जब ग्राम द्वारा चित्रित ग्राम में जीवाणु फ्लोरा की तैयारी की जाती है, तो सेरेब्रोस्पाइनल तरल पदार्थ का एक और अध्ययन संबंधित बैक्टीरियोलॉजिकल तकनीकों के अनुसार किया जाता है। माइक्रोस्कोपी के बाद, प्रक्षेपित 3 कप ताजा तैयार, सूखे wort-agar या agar saburo के साथ ही तरल wort या तरल saburo माध्यम पर तरल बुवाई का उत्पादन करता है। तरल तलछट की 2-3 बूंद तरल के पौष्टिक agar की सतह पर लागू होते हैं और स्पुतुला को अच्छी तरह से रगड़ते हैं, और महापाषाण मशरूम के पता लगाने के लिए अग्रगर की सतह पर तीन बिंदुओं पर 1 बूंद बुवाई। शेष तरल पदार्थ को तरल wort या agar saburo के 5 मिलीलीटर में स्थानांतरित किया जाता है। फसलों को दो तापमान मोड में सेते हैं: एक कप 1 - +37 ओ सी, और कप 2 और 3 पर और तरल माध्यम पर बुवाई - +28 डिग्री सेल्सियस पर +30 ओ सी। +37 के तापमान पर बोना डिग्री सेल्सियस 2 और 5 दिन, और 28 - 30 डिग्री सेल्सियस पर - 4.7.10 विकास के विकास पर। यदि 5 दिनों के तापमान पर +37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर और 10 वें दिन में विकास के साथ 28-30 ओ के तापमान पर, यह ध्यान नहीं दिया जाता है, एक तरल पोषक माध्यम से कपड़ों को वॉर्ट या अग्र सबुरो के साथ कप तक उत्पादित किया जाता है। खमीर वनस्पति के विकास की अनुपस्थिति में, तरल बुवाई का नतीजा नकारात्मक के रूप में दर्ज किया जाता है।

अलग फिस्टुला। अध्ययन मूल या चित्रित दवाओं में सामग्री की माइक्रोस्कोपी के साथ शुरू होता है। फिर अग्र मध्यम (वॉर्ट या सबू) पर बुवाई सामग्री बनाएं, जिसके लिए अलग-अलग 2-3 बूंदें और स्पुतुला को अग्र की सतह में विभाजित किया गया है। Sevings 48 घंटे के लिए + Z7 के लिए से ऊष्मायन किया जाता है।

अलग श्लेष्म झिल्ली।

1. टैम्पन को ट्यूब में 2 मिलीलीटर तरल माध्यम (वॉर्ट, सबको या एमपीबी पर्यावरण) के साथ रखा गया है और प्लग को चुप किए बिना 5-7 मिनट हिलाएं। दोपहर 1:10, 1: 100 और प्रत्येक प्रजनन के 0.1 मिलीलीटर सस्लो-अग्र, अग्र सबुरो या एमपीए में बीज तैयार करें। घने मीडिया पर बुवाई और एक टैम्पोन (संवर्द्धन के लिए) के साथ एक तरल माध्यम के साथ एक ट्यूब +37 सी के तापमान पर +37 सी के तापमान पर सेते हैं। उपनिवेशों की संख्या गणना की जाती है और लगभग एक टैम्पन द्वारा ली गई खमीर कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करती है। इसके लिए, उगाए जाने वाले खमीर उपनिवेशों की संख्या 20 और प्रजनन के लिए गुणा हो जाती है। ले जाने वाले कपों पर कॉलोनियों के विकास की अनुपस्थिति में, एक कप के लिए एक कप के लिए एक कप के लिए समृद्ध माध्यम से फिर से घिरा हुआ है।

2. पोषक माध्यम की सतह पर घूर्णन के साथ एक टैम्पन आयोजित करके बुवाई की जा सकती है। साथ ही, खमीर उपनिवेशों की मात्रा को ध्यान में नहीं रखा जाता है, और केवल विकास की उपस्थिति और तीव्रता नोट की जाती है: एकल उपनिवेश, महत्वपूर्ण या ठोस विकास, माइक्रोबायोटा विकास की कमी।

रक्त। Gemoculture प्राप्त करने के लिए शिरापरक रक्त के नमूने कम से कम 1: 5, समृद्ध माध्यम को पतला करने के लिए आवश्यक है ताकि रक्त की जीवाणुनाशक गुण मशरूम के विकास को बाधित न करें। 5-10 मिलीलीटर ताजा रक्त क्रमशः, क्रमशः पोषक माध्यम के 50-100 मिलीलीटर में क्रमशः (तरल सबुरो अपने पुनर्जन्म के बाद 2% ग्लूकोज या वेज व्हेल-टैरिफ के साथ)। बुवाई के लिए, आप एंटीकोगुलेंट के साथ रक्त ले सकते हैं (1:10 5% सोडियम साइट्रेट समाधान)। 5 और 10 दिनों तक नियंत्रण संक्षेप में +37 डिग्री सेल्सियस पर सेविंग्स 10 दिन बढ़ते हैं। बाँझ पिपेट एक प्रक्षेपण लेता है, 3 बूंदें पेट्री व्यंजनों में वॉर्ट-अग्रर की सतह पर जीवाणुविज्ञान लूप को गंध करती हैं। बीजित कप को एक थर्मोस्टेट में 2-5 दिनों के लिए +37 डिग्री सेल्सियस के तापमान के साथ रखा जाता है। विकास के मामले में, खमीर वनस्पति रक्त में मशरूम की उपस्थिति के लिए प्रारंभिक उत्तर जारी करती है, और संस्कृति जीनस और प्रजातियों के लिए निर्धारित होती है।

एक और बुवाई विधि Mikoflora (H.Rieth) पर वर्णित है। इस मामले में, 5-10 मिलीलीटर रक्त उत्पादन की बूंदों की बुवाई। बूंदों के बीच 0.5 सेमी की दूरी पर पेट्री कप में घने पोषक माध्यम की सतह पर रक्त की 40-50 बूंदें लागू होती हैं। बुवाई को दो कप पेट्री पर उत्पादित किया जाता है, एक कप में +37 ओ सी के तापमान पर और दूसरे में कमरे के तापमान पर 2-5 दिनों के लिए किया जाता है।

अंगों के ऊतकों के टुकड़े। पेट्री डिश में घने पोषक माध्यम की सतह पर कपड़े के परीक्षण टुकड़े के साथ एक प्रिंट बनाएं, फिर लॉय का उत्पादन करें। कपड़े का एक ही टुकड़ा 50 मिलीलीटर तरल पोषक तत्व माध्यम (सस्लो, सबूरो बुधवार) में रखा जाता है। 5 दिनों के भीतर +37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर थर्मोस्टेट में सेविंग्स को ऊष्मायन किया जाता है।

त्वचा और नाखून के गुच्छे। माइक्रोस्कोपी परिणामों के बावजूद बुवाई तराजू का उत्पादन। इस बाँझ माइक्रिकल ब्लेड के लिए, कंडेनसेट माध्यम में गीला, फ्लेक्स को 2-3 अंकों में एक बेज वाले वॉर्ट-अग्रर पर एक टेस्ट ट्यूब में स्थानांतरित किया जाता है, जिससे उन्हें माध्यम की सतह पर दबाया जाता है। अध्ययन में प्रवेश करने वाली सामग्री की संख्या के आधार पर, बुवाई 2-3 टेस्ट ट्यूबों में बनाई गई है। 28-37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 5 दिनों के तापमान पर एक थर्मोस्टेट में सेवन किया जाता है।

तेज पहचान विधियों का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। C.albicans।। यह प्रजाति अंकुर ट्यूबों और लघु स्यूडोमिटिया थ्रेड्स को कई घंटों (37 डिग्री सेल्सियस पर 37 डिग्री सेल्सियस पर) बनाने में सक्षम है, सीरम, अंडे प्रोटीन पर, सुई माध्यम पर, 1 99 माध्यम आदि के लिए। व्यावहारिक रूप से प्रयोगशालाओं में मानव सीरम (सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं से अवशेष) का उपयोग किया जाता है, जहां 37 ओ सी पर एक स्पाइक ट्यूब बनाया जाता है, और 24 घंटों के बाद, स्यूडोमिटिया टेंगल। दयालु C.albicans। यह घटना 90% मामलों की विशेषता है। रोस्ट शायद ही कभी गठित होते हैं C.tropicalis।

2.3। मोल्ड मशरूम के कारण संदिग्ध mycoses में रोगजनक सामग्री की सूक्ष्म परीक्षा और बुवाई

रोगजनक सामग्री की देशी और चित्रित दवाओं में जांच की जा सकती है। माइक्रोड की तैयारी के लिए उद्देश्य और कोटिंग चश्मे, माइक्रोबियम वायु द्वारा प्रदूषण से बचने के लिए ईथर (1: 1) के साथ अल्कोहल के मिश्रण में संग्रहीत किया जाना चाहिए। उपयोग से पहले, मूल और कोटिंग चश्मे बर्नर की लौ पर निर्जलित होते हैं।

माइक्रोस्कोपी सामग्री

मिक्रोस्कोपी स्पुतम। मूल दवाओं की तैयारी के लिए, स्पुतम को पेट्री के एक बाँझ कप में स्थानांतरित कर दिया जाता है और छोटे कणों (गांठ) का पता लगाने के लिए एक काले रंग की पृष्ठभूमि पर दृश्य होता है। पंप purulent, purulent-श्लेष्म, purulent खूनी हो सकता है। गांठों के आयाम व्यास में 0.3-3 मिमी के भीतर परिमाण में भिन्न होते हैं, उनके रंग ग्रे, पीले, हरे रंग के हो सकते हैं। मूल microdrugs की तैयारी के लिए, व्यक्तिगत गांठों को ग्लिसरीन के साथ अल्कोहल की एक बूंद में, या 10% समाधान कॉन की बूंद में precipitated सुइयों या बैक्टीरियोलॉजिकल loops के साथ स्थानांतरित किया जाता है। कोटिंग ग्लास के साथ कवर, कमजोर रूप से वैकल्पिक सुई और माइक्रोस्कोपी को छोटे (1:80, ऐपिस 10 एक्स और लेंस 8 एक्स) और बड़े (1: 400, ऐपिस 10 एक्स और लेंस 40 एक्स) में माइक्रोस्कोप में बढ़ता है।

वाशिंग पानी की तैयारी, exudate, साथ ही साथ पित्त, मूत्र, गैस्ट्रिक रस, शराब एक देशी तलछट से या सेंट्रीफ्यूगेशन (5 मिनट के लिए 1500 आरपीएम पर) के परिणामस्वरूप तलछट से तैयार की जाती है। लूप या पार्सर पिपेट की तलछट स्लाइड पर 10% वास्तविकता समाधान की बूंद में ले जाया जाता है, जिसे कोटिंग ग्लास के साथ कवर किया जाता है और माइक्रोस्कोप की छोटी और बड़ी वृद्धि के साथ माना जाता है।

रंगीन तैयारी की तैयारी के लिए, एक पतली धब्बा पैदा करने के लिए बाँझ स्लाइड की सतह पर तैयारी सुइयों या छोटे आकार के पतली आकार के पतली आकार के पतली आकार के पतली आकार के पतली आकार के पतले गिलास द्वारा समान रूप से वितरित किया जाता है। परिणामी धुंध हवा में सूख जाता है, मिथाइल अल्कोहल के साथ तय किया जाता है या 3-5 मिनट के लिए निकिफोरोव (96% एथिल अल्कोहल और ईथर के बराबर भागों) का मिश्रण, या बर्नर की लौ पर तीन रंगीन फ्लशिंग। निश्चित स्ट्रोक ग्राम, आरएएस-विधि, कैलकैफ्लोरोमा सफेद में चित्रित होते हैं। माइक्रोस्कोप विसर्जन प्रणाली का उपयोग करके चित्रित दवा माइक्रोस्कोपिक (1: 900, ऐपिस 10 एक्स, लेंस 9 0)।

बुवाई सामग्री

Mycelial मशरूम पर किसी भी रोगजनक सामग्री के अध्ययन में, यह Saburo या Streptomycin (माध्यम के 100-200 इकाइयों / एमएल) के अलावा Saburo या wort के घने माध्यम पर बीजित किया गया है। बुवाई को दो पुनरावृत्ति में उत्पादित किया जाता है, जो बढ़ते माइकलियल मशरूम (+37 डिग्री सेल्सियस और +28 डिग्री सेल्सियस) के विभिन्न तापमान मोड देखते हैं, जो हमेशा कप के केंद्र में 3 अंक में होते हैं। ऊष्मायन समय 4-5 दिन है।

स्पुतम (चयनित गांठ) को Saburo या Susl वातावरण की सतह पर बैक्टीरियोलॉजिकल लूप या पार्सर पिपेट में स्थानांतरित किया जाता है। एक पेंसिल के साथ एक पेंसिल बुवाई पीछे की ओर पेट्री कप नीचे। थर्मोस्टेट कवर में पेट्री व्यंजन।

ऊष्मायन की एक निश्चित अवधि के बाद, बीजित कप देखे जाते हैं और जगमगाने का पता चला है जब मशरूम की संस्कृति निर्धारित की जाती है। छतरियों की अनुपस्थिति में, फंगस को आगे की पहचान के लिए एक अंतर चैपेका पर्यावरण पर रखा गया है।

ब्रोंची, समलैंगिक गुहाओं, exudate, मूत्र, गैस्ट्रिक रस (मूल या सेंट्रीफ्यूगेशन) के वाशिंग पानी की वापसी को एक विंदुक द्वारा लिया जाता है और 0.1 मिलीलीटर की मात्रा में बोया जाता है। मल को पृथक के साथ तरल माध्यम में 1:10 (1 जी मल और 9 मिलीलीटर तरल) तलाकशुदा हैं या सोडियम क्लोराइड के तरल बाँझ आइसोटोनिक समाधान, emulsified, बड़े कणों को प्रच्छि बनाने के लिए 10 मिनट बचाव किया, की मात्रा में सतह पर तैरनेवाला बीज 0.1 मिली। अलग-अलग बाहरी श्रवण मार्ग और ज़िया, एक टैम्पन द्वारा लिया गया, बोना, पोषक माध्यम की सतह पर टैम्पन के प्रत्येक तरफ पूरी तरह से आयोजित करना। आप टैम्पन के साथ धो सकते हैं। ऐसा करने के लिए, टैम्पन को साबा या तरल पदार्थ के तरल माध्यम के तरल माध्यम में ग्लास मोती के साथ रखा जाता है और 10 मिनट, एक लॉन (लेशचेन्को वीएम, 1 9 73 द्वारा), या तीन बिंदुओं के साथ एक टैम्पन के साथ 0.1 मिलीलीटर फ्लशिंग के 10 मिलीलीटर में रखा जाता है।

त्वचा और नाखून के गुच्छे पोषक माध्यम की सतह पर रखे जाते हैं, अच्छी तरह से उन्हें दबाकर।

सेरेब्रोस्पाइनल तरल पदार्थ (5 मिनट के लिए 1500 आरपीएम पर अपकेंद्रित्र) की तलछट 0.1 मिलीलीटर के माध्यम के दो कपों से बोली जाती है, और इसके अवशेष को समृद्धि माध्यम (सबुरो या तरल वोर्ट के तरल माध्यम) में शेड किया जाता है, परीक्षण के अनुसार फैल गया 5 मिलीलीटर की मात्रा में ट्यूब। बीजित कप सामान्य रूप से ऊष्मायन होते हैं, और समृद्धि माध्यम पर बुवाई के साथ परीक्षण ट्यूबों - 10 दिनों के लिए + 28 डिग्री सेल्सियस पर।

घने मीडिया पर मैसिलियल मशरूम की वृद्धि के मामले में, संस्कृति को इस बुवाई से निर्धारित किया जाता है, सबुरो-अग्रर या वॉर्ट-अग्रर पर वृद्धि की अनुपस्थिति में, कवक को संवर्धन वातावरण से अध्ययन किया जाता है। इसके लिए, कवक की संस्कृति एक बार फिर चैपेका के एक अलग तंग माध्यम और भविष्य में पहचानने पर रखा गया है।

बॉडी फैब्रिक (बायोप्सी, ऑटोप्सी) के एक टुकड़े से तीन बिंदुओं पर अध्ययन किए गए टुकड़े के एक आउटक्रॉपेड पक्ष के साथ घने माध्यम की सतह पर एक छाप बनाते हैं। साथ ही, ऊतकों के टुकड़े 50 मिलीलीटर तरल पोषक तत्व माध्यम (सबुरो, वॉर्ट) में रखा जाता है।

दो तीन पुनरावृत्ति में कवक के संदेह से रक्त की जांच की जाती है। 5 या 10 मिलीलीटर रक्त क्रमश: 2% ग्लूकोज के साथ Saburo तरल माध्यम के 50 या 100 मिलीलीटर क्रमशः बीजित हैं। फसलों को 10 दिनों के लिए +37 एस और +28 सी पर उगाया जाता है। फसलों की पहली देखने के लिए 5 दिनों में किया जाता है, दूसरा - 10 दिनों के बाद। पांचवें दिन, आप नीचे और सतह फिल्म पर एक महसूस गांठ के रूप में मैससेलियल मशरूम के विकास का निरीक्षण कर सकते हैं। फंगन को जीनस और मशरूम के प्रकार को निर्धारित करने के लिए चैपेका के एक अलग माध्यम पर रखा गया है। यदि 5 दिन पर कवक की वृद्धि ध्यान नहीं दी जाती है, तो फसलों को 10 दिनों तक रखा जाता है और विकास की अनुपस्थिति में, अध्ययन के परिणाम नकारात्मक के रूप में पंजीकरण करते हैं।

तीन अंक बुवाई करते समय, दो और तीन बिंदुओं में मशरूम की वृद्धि को एक बिंदु पर एक डायग्नोस्टिक रूप से महत्वपूर्ण के रूप में परिभाषित किया जाता है। यदि आवश्यक हो, तो दोहराई गई बुवाई संभव है।

मोल्ड कवक की चयनित फसलों की पहचान

एक संस्कृति के चयन के बाद, माइकलियल मशरूम जेनेरिक के लिए एक अलग-अलग बुधवार चैपेका पर रखा जाता है, यदि संभव हो, तो निर्दिष्ट परिभाषा।

नैदानिक \u200b\u200bप्रयोगशालाओं के अभ्यास में, एक नियम के रूप में, संस्कृति-मॉर्फोलॉजिकल पहचान मानदंडों का उपयोग किया जाता है: मोटे मीडिया (संस्कृति निदान, मैक्रोमोर्फोलॉजी) और मशरूम माइक्रोमॉर्फोलॉजी पर मशरूम की संस्कृति के विकास की प्रकृति का आकलन करता है।

मुश्किल मामलों में, निदान के अतिरिक्त तरीकों का उपयोग किया जाता है (एंजाइमेटिक गतिविधि का अध्ययन, कुछ मोल्ड कवक के विकास की तापमान विशेषताएं)।

मैक्रोमॉर्फोलॉजी (संस्कृति संकेतों) की अवधारणा में एक कॉलोनी संरचना (शराबी, महसूस, मखमली, वेब, ऊनी, रोलिंग, ख़स्ता, आदि), सतह (फ्लैट, फोल्ड, छोटी गाड़ी, गुंबद, पर्वतमाणिक, क्षेत्रीय, आदि), पिग्मेंटेशन शामिल है मशरूम कॉलोनी और सब्सट्रेट (हरे, नीले, बैंगनी, काले, भूरे, आदि के विभिन्न रंग, कॉलोनी की सतह पर एक exudate की उपस्थिति।

सांस्कृतिक मशरूम की माइक्रोमॉर्फोलॉफ का अध्ययन दवाओं द्वारा किया जाता है, जो सामान्य संबद्धता के आधार पर, कवक को निम्नानुसार तैयार किया जाता है: तरल तरल की एक बूंद त्वचा कांच (शराब, ग्लिसरीन और पानी के बराबर भागों) पर लागू होती है; इसे केंद्रीय और परिधीय भागों के कब्जे के साथ त्रिभुज के रूप में एक टाइलोनी से एक माइक्रिकल ब्लेड के साथ मशरूम के एक टुकड़े में रखा जाता है, दो टीका की सुइयों ने हवा के बुलबुले के गठन से बचने के लिए सावधानी के साथ कट टुकड़ा फैलाया। कुछ मामलों में (मुको और रिज़ोपस), दवा तैयार करते समय, फंग को सूखे स्लाइड ग्लास पर रखा जाता है, तरल की एक बूंद इसे लागू होती है और कोटिंग ग्लास के साथ कवर होती है। तैयारी को छोटे और बड़े ज़ूम पर एक माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है। सब्सट्रेट और वायु मायसेलियम का अध्ययन कर रहे हैं, एसईपीटीए (विभाजन) की उपस्थिति या अनुपस्थिति का उल्लेख किया गया है, जीनिंग की प्रकृति पर ध्यान दें: Conidians के साथ conidias और sporangipro के साथ sporangies।

CondiSenos उनकी संरचना में अलग हैं: सरल एकल स्पोरिंग जीआईएफ से ब्रांच किए गए वृक्ष संरचनाओं तक। Conidienies एक या समूहों द्वारा व्यवस्थित किया जाता है, वे वनस्पति gif mycelium, रंगहीन या चित्रित, recising, repenenction, गिरने, sharpening से अलग-अलग अलग-अलग हैं। उनमें एक सेल और बड़ी संख्या में विभिन्न कोशिकाओं और कोशिकाओं की परिमाण से हो सकते हैं, जिनमें से प्रत्येक का अपना नाम है। उदाहरण के लिए, एस्परगिलस की तरह, conidioner में निम्नलिखित कोशिकाएं होती हैं: पैर, बुलबुला सूजन, स्टेरिंब, शॉनडियम की श्रृंखला। जीनस पेनिसिलियम में, Conidioneer के पास सरल या जटिल ब्रश का आकार होता है, जिसमें विभिन्न कोशिकाएं होती हैं: जुड़वां, मेसुल, फलाइड, शॉनिडियम की श्रृंखलाएं।

एंडोस्पोरेंजियोस के साथ स्पोरैंगियों के रूप में मोल्ड मशरूम म्यूकर और राइजोपस जिमनिंग पर। स्पोरजी स्पोरैंगियन के अंत में है। गोलाकार या नाशपाती के आकार की स्पोरांगे, बहुमत में एक विशेष स्तंभ के साथ, जो स्पोरैंगियम के अंदर स्पोरेंजियनपीस की निरंतरता है। स्पोरैंगिप्रो गोलाकार, रंगहीन या चित्रित।

मोल्ड मशरूम में कॉनिडिया (विवाद) पॉलिमॉर्फिक (बेलनाकार, गोलाकार, अंडाकार, दीर्घवृत्त, अंडाकार, नाशपाती के आकार का, पुरुष के आकार) एकल और बहुकोशिकीय, आकार और रंग, एकल, श्रृंखला या सिर में एकत्रित होता है और एम्बेडेड होते हैं। शनिष्ठ की सतह चिकनी, मोटा, छील, मस्तिष्क, ब्रिस्टल इत्यादि हो सकती है।

माइक्रोस्कोपिक परीक्षा और मिकासख में पैथोलॉजिकल सामग्री की बुवाई द्विमशाली मशरूम के कारण हुई

इन तरीकों से रोगजनकों के विभाजन को ध्यान में रखना आवश्यक है।

प्राथमिक रोगजनक माइकोटिक संक्रमण (CociDioidosis, हिस्टोपोडोसिस, पैरासिडियोडियोइडोसिस, उत्तरी अमेरिकी ब्लास्टोमाइकोसिस) के लिए पैथोलॉजिकल सामग्री, साथ ही क्रोमोमिकोसिस, स्पाइडरहोज, और मेट्ज़ेटोम्स को चमड़े और श्लेष्म झिल्ली, सेरेब्रोस्पाइनल तरल पदार्थ, रक्त, बायोपिक पर पेप्टिक घावों के साथ स्क्रैप्स हो सकते हैं foci हार से टुकड़े।

इन माइकोस के रोगजनकों को निर्धारित करने में कठिनाई यह है कि पेटीमीटर माइक्रोस्कोपी के दौरान उनके deporphism के कारण, कवक के ऊतक रूपों को पाया जाएगा, अक्सर एंडोस्पोल के साथ विभिन्न रूपरेखा या गोलाकारों की खमीर कोशिकाएं, पूरी तरह से एक ही मशरूम के तत्वों के लिए असंतुष्ट , एक पारंपरिक Agava Saburo पर +28 - +30 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर बड़े पैमाने पर एक पारंपरिक Agava Saburo पर निकाले गए, एसिडिक के करीब निकलता है। हालांकि, यह ध्यान में रखना चाहिए कि कवक के विकास के खमीर चरण की संस्कृति में कुछ diporpic कवक भी प्राप्त किया जा सकता है, अक्सर अपने कपड़े के रूप में याद दिलाता है, लेकिन एक कमजोर के साथ प्रोटीन में समृद्ध मीडिया पर बढ़ते समय क्षारीय प्रतिक्रिया (पीएच \u003d 7.6 - 7.8), 37 ओ सी के तापमान पर।

उपरोक्त मशरूम को संदर्भित करता है: हिस्टोप्लाज्मा कैप्सूलटम, ब्लास्टोमाइसेस डर्माटिटिसिस, पैराकोस्किडियोसिस ब्रासिलियंसिस, कोकोइडियोइड्स इमाइटिस तथा स्पोरोथ्रिक्स Schenckii।

यहां वर्णित मशरूम के कारण होने वाले मशरूम के प्रयोगशाला निदान माइक्रोस्कोपी के दौरान रोगजनक सामग्री में ऊतक रूपों, रोगजनक की संस्कृति को अलग करने और संस्कृति-मॉर्फोलॉजिकल विशेषताओं द्वारा इसकी पहचान की पहचान के आधार पर आधारित है।

माइक्रोस्कोपिक परीक्षा 10% क्षार मीटर समाधान या ग्लिसरीन के बराबर मात्रा या चित्रित स्ट्रोक (तालिका 3) में अल्कोहल के मिश्रण में स्लाइड पर गैर-रंगीन तैयारी में उत्पादित की जाती है।

आम तौर पर स्वीकृत तकनीक के अनुसार एक बैक्टीरियोलॉजिकल स्पैटुला का उपयोग करके पेट्री व्यंजनों में उपरोक्त पोषक तत्व मीडिया पर रोगजनक सामग्री के बीज का उत्पादन होता है।

2.5। माइक्रोस्कोपिक परीक्षा और त्वचा रोग विज्ञान सामग्री की बुवाई (केराटोमिकोसिस और त्वचीय) में।

अध्ययन की वस्तु सतह के माइक्रोज़ है, जो केवल एपिडर्मिस की केराटाइन परत को प्रभावित करती है, और त्वचा को प्रभावित करती है, त्वचा और उसके परिशिष्ट (बाल, नाखून) को प्रभावित करती है, जिनके रोगजनियों के प्रसव से संबंधित मशरूम होते हैं Trichophyton, microporum और epidermophytonton।

प्रयोगशाला माइक्रिकल रिसर्च में अन्य तरीकों के समान चरणों शामिल हैं: सामग्री की माइक्रोस्कोपी और इसे बुवाई करते समय स्वच्छ संस्कृति प्राप्त करना। उचित सामग्री माइक्रोस्कोपी और संस्कृति की सफलता को अत्यधिक प्रभावित करती है।

लेने के बाद अगली बार पैथोलॉजिकल सामग्री की जांच की जाती है। यह तीन भागों में पूर्व-विभाजित है: माइक्रोस्कोपी, खेती और पुन: सीखने के लिए। रोगजनक सामग्री की माइक्रोस्कोपी ऊतकों में मशरूम की उपस्थिति स्थापित करने का सबसे आसान और तेज़ तरीका है। Crumpled सामग्री को 10-20% की गिरावट में विषय ग्लास के बीच में रखा गया है और शराब की लौ पर थोड़ा गर्म किया जाता है जब तक कि सफेद रिम ड्रॉप के किनारे के साथ प्राप्त नहीं होता है, कोटिंग ग्लास के साथ कवर और मैक्रेशन और ज्ञान के लिए 5-10 मिनट (बाल, त्वचा के तराजू) और 30 मिनट (नाखून) के लिए छोड़ दें; सामग्री को हीटिंग के बिना संसाधित किया जा सकता है, इसके लिए, दवा 30-60 मिनट तक 20% कॉन में छोड़ी गई है।

माइक्रोस्कोपिक पहले छोटे, फिर माइक्रोस्कोप में बड़ी वृद्धि।

रोगजनक को हाइलाइट करने और पहचानने के लिए सांस्कृतिक अनुसंधान आवश्यक है। सामग्री जितना संभव हो सके कुचल दी गई है और 1-2 सेमी की दूरी पर 2-3 अंकों की ट्यूबों में बज़्ड agar पर न्यूनतम मात्रा में गिरती है। एक नमूने की सामग्री कम से कम 2-3 ट्यूबों को बीजित करती है ( बाल) और 4-5 ट्यूब (त्वचा और नाखून तराजू)। डार्मेटोफाइट्स के प्राथमिक इन्सुलेशन के लिए, मानक agarized saburo माध्यम का उपयोग 2-4% ग्लूकोज या वोर्ट agar के साथ एंटीबैक्टीरियल एंटीबायोटिक्स (पेनिसिलिन 50 माइक्रोग्राम / एमएल + स्ट्रेप्टोमाइसिन 50 μg / एमएल या बायोमाइसिन 200 / मिलीलीटर) और विरोधी- फ्लैप एंटीबायोटिक Aktidion (Cycoheximide) 0.1 - 0.5 मिलीग्राम / एमएल। Aktidion Dermatophytes के विकास को प्रभावित नहीं करता है और कई मोल्ड मशरूम, साथ ही Candida और Cryptococcus के प्रकार को दबाता है।

22-30 ओ सी (केवल 28 ओ सी) पर सेविंग्स से ऊष्मायन होते हैं। डर्माटोफाइट्स की वृद्धि की उपस्थिति सामग्री के किनारों के साथ बुवाई बिंदुओं पर 4 से 12 दिन ऊष्मायन से चिह्नित की जाती है। 30 दिनों के लिए विकास की अनुपस्थिति में, खेती के परिणाम नकारात्मक माना जाता है। इष्टतम स्थितियों के तहत, कई डार्मेटोफाइट की प्राथमिक संस्कृतियों को बुवाई के 7-10 दिनों के बाद पहचाना जा सकता है, लेकिन 20-30 दिनों के भीतर आवश्यक फसलों की निगरानी करता है। प्राथमिक संस्कृतियां अपेक्षाकृत धीरे-धीरे बढ़ रही हैं और एंटीबायोटिक दवाओं के बिना मीडिया का उपयोग करते समय, त्वचीय को तेजी से बढ़ते बैक्टीरिया या मोल्ड मशरूम द्वारा दबाया जा सकता है। प्राथमिक बुवाई में वृद्धि होने पर, कॉलोनी के किनारे से एक स्वच्छ संस्कृति प्राप्त करने के लिए एक ताजा अंतर माध्यम में लेना आवश्यक है जो समर्पित डार्माटोफाइट की पहचान करने के लिए सामग्री के रूप में कार्य करेगा।

2.6। माइकोस के निदान के सीरोलॉजिकल तरीके

सीरोलॉजिकल विधियों का मूल्य मुख्य रूप से निम्नलिखित में है: संभावित आक्रामक तरीकों वाले मरीजों की पहचान; एलर्जी संबंधी बीमारियों की माइकोटिक प्रकृति की पुष्टि; माइकोस के विकास के जोखिम के सर्वेक्षण।

असत्य सकारात्मक नतीजे दुनिया में सीरोलॉजिकल नमूने संभव हैं और स्वस्थ लोगमशरूम के एंटीजनों द्वारा संवेदनशील, नकारात्मक नमूने होने वाले आक्रामक मिकोज की पृष्ठभूमि पर भी इम्यूनोडेफिशियेंसी में हो सकते हैं।

नियमित रूप से माइकोस के सीरोलॉजिकल डायग्नोस्टिक्स के रूप में स्वीकार्य तरीके
यह /p.n द्वारा पर्याप्त रूप से विस्तृत है। Kashkin, v.v.lysin। "व्यावहारिक
मेडिकल मिकोलॉजी गाइड, मेडिसिन, 1 9 83 /। हालांकि, आखिरी में
दशकों को विधिवत दृष्टिकोण / एलिनोव एनपी में ध्यान देने योग्य बदलाव हुए,
2001 /। मूल एंटीजन और एंटीबॉडी पहचान प्रक्रियाओं का प्रस्ताव है।
मशरूम कोशिकाओं के कुछ मेटाबोलाइट्स; विशेष नैदानिक \u200b\u200bबनाया
किट ("व्हेल"), उदाहरण के लिए Pastorex ® Candida, निर्धारित करने के लिए
Antigenic के oligomannous epitopes दोहराए जाने के "लेटेक्स- agglutination" प्रतिक्रियाएं
संरचना / बड़े पैमाने पर मैक्रोमोल्यूल्स पर व्यक्त
मशरूम; उदाहरण के लिए, एंटीजन-मानना \u200b\u200bकैंडिडा निर्धारित करने के लिए
कैंडी प्रशासन के साथ रोगी सीरम, आप प्लेटेलिया® Candida सेट का उपयोग कर सकते हैं।
एंटीजनिक \u200b\u200bसंरचनाओं को निर्धारित करने के लिए थ्रेसहोल्ड के पहले सेट का उपयोग करना 2.5 एनजी / मिलीलीटर है, जो कि एक बंडल में दूसरे का उपयोग करके, दृढ़ संकल्प सीमा के साथ एक बंडल में है - 0.5 एनजी / एमएल।

माइकोस के रोगजनकों को अक्सर विभिन्न नैदानिक \u200b\u200bसामग्री के प्रयोगशाला अध्ययन के साथ पाया जाता है

रक्त

कैंडिडा।
क्रिप्टोकोकस
माइकलियल रोगजनकों को शायद ही कभी रक्त परीक्षणों में पाया जाता है Fusarium।

रीड़ द्रव

कैंडिडा।
क्रिप्टोकोकस

पंप, फोड़े, अल्सर, आदि से अलग।

कैंडिडा।
क्रिप्टोकोकस
Fusarium।
Aspergillus।
स्पोरोट्रिक्स।

श्वसन रहस्य (मोचोटा, बॉल, ब्रोन्कियल ब्रश बायोप्सी, ट्रांसरेजल आकांक्षा)

Aspergillus।
कैंडिडा।
क्रिप्टोकोकस
म्यूकोर।
स्केडोस्पोरियम।
Rhizopus।
स्पोरोट्रिक्स।

अलग, बायोप्सी सामग्री घावों से

Aspergillus।
कैंडिडा।
Fusarium।
Rhizopus।

अन्य बायोसबस्ट्रेट्स

कैंडिडा।
क्रिप्टोकोकस

थोरैसिक, पेट की गुहा से बना सामग्री; सिनोवियल द्रव

Aspergillus।
कैंडिडा।
Fusarium।

नेत्रकाचाभ द्रव

कैंडिडा।
Aspergillus।

Iv। नैदानिक \u200b\u200bमानदंड सिस्टमिक मिकोसोव: अंतिम निदान के नैदानिक \u200b\u200bऔर प्रयोगशाला पैरामीटर

Ezophagitis

एसोफागोस्कोपी में विशेषता परिवर्तनों की उपलब्धता
बायोप्सी सामग्री की खेती में मशरूम की पहचान
पेंटेड स्ट्रोक या बायोप्सी में मशरूम के आक्रामक विकास के संकेतों में स्यूडोमिटिया की उपस्थिति

न्यूमोनिया

निमोनिया, के कारण कैंडिडा एसपीपी।

फंगन निमोनिया के नैदानिक \u200b\u200bअभिव्यक्तियों के साथ मेल खाने वाले फेफड़ों के रेडियोग्राफ पर घुसपैठ में परिवर्तन उत्पन्न करना
खोज कैंडिडा एसपीपी।एक ट्रांसहोकल बायोप्सी, ट्रांसब्रोनिक बायोप्सी, डिस्कवरी के दौरान प्राप्त श्वसन अपशिष्ट के निचले विभागों से सामग्री की खेती करते समय लाइट बायोप्सी या टॉरकोसोपिक रूप से निर्देशित बायोप्सी
पर्याप्त रूप से चित्रित बायोप्सी सामग्री में स्यूडोमिटिया का पता लगाना

निमोनिया, के कारण एस्परगिलस एसपीपी।, फुसरियम एसपीपी।, स्केडोस्पोरियम एपियोस्पर्मम

ऊतकों और सकारात्मक संस्कृति में मशरूम के तत्वों की पहचान
फेफड़ों में persoizing या प्रगतिशील घुसपैठ, जीवाणुरोधी चिकित्सा के प्रतिरोधी
स्पुतम या गेंद की खेती में निर्दिष्ट रोगजनकों में से एक का पता लगाना
निमोनिया के नैदानिक \u200b\u200bसंकेत (खांसी, सांस की तकलीफ, "फुफ्फुसीय" दर्द, घर्षण, घर्षण शोर
रेडियोग्राफी या सीटी फेफड़ों में विशेषता परिवर्तन:

बेसमेंटल घुसपैठ, नोड्यूल, तीव्र या गुफाओं में परिवर्तन

सीटी फेफड़ों के साथ "हेलो" का लक्षण

गुहाओं के गठन और बीमारी के लक्षण की उपस्थिति में घुसपैठ परिवर्तनों की प्रगति

अन्य रोगजनकों की कमी जब गेंद की खेती होती है जो फेफड़ों में सबमिट किए गए परिवर्तनों का कारण बन सकती है

साइनसिसिटिस

तीव्र साइनसिसिटिस के नैदानिक \u200b\u200bऔर रेडियोलॉजिकल संकेत
आकांक्षा या बायोप्सी सामग्री के अध्ययन में माइक्रोसा के सूक्ष्म और सांस्कृतिक संकेत

मूत्र पथ के संक्रमण

पहचान\u003e 1x10 सीएफयू / एमएल सही ढंग से इकट्ठा मूत्र की बार-बार फसलों के साथ

फंगमिया

शरीर के तापमान की उठाने की अवधि के दौरान रक्त को फसल करते समय मशरूम का एक बार का पता लगाना\u003e 38 ओ सी

तीव्र प्रसारित माइकोसिस

गहरे ऊतक घावों के सांस्कृतिक या हिस्टोलॉजिकल संकेतों के साथ संयोजन में फंगमिया (सहित) चमड़े के नीचे ऊतक) या बाँझ biosubstrates के मानदंड में दो से रोगजनक की पहचान

एंडोफ्थाल्मिता

एंडोफ्थाल्मिता के नेत्रहीन संकेत
आंख, रक्त या प्रसार के अन्य foci से रोगजनक की पहचान

फोड़ा या ओस्टियोमाइलाइटिस

एक्स-रे / सीटी / एमआरआई ऑस्टियोमाइलाइटिस के संकेत
आकांक्षा या बायोप्सी सामग्री में कारक एजेंट का पता लगाना

मस्तिष्कावरण शोथ

सीएमएफ के परिवर्तनों को निर्धारित करना सूजन की उपस्थिति और एसएमएफ की माइक्रोस्कोपी के दौरान मशरूम की पहचान की पुष्टि करना
फसलों की फसलों या परिभाषा जब मशरूम की पहचान Cr.neoformans, Candida और Aspergillusएसएमजी में

पुरानी प्रसार (हेपेटोलिनल) कैंडिडिआसिस

संभव के

संयोजन में न्यूट्रोपेनिया अवधि के पूरा होने के बाद लगातार या अस्थायी बुखार विशेषणिक विशेषताएं लिवर घाव, प्लीहा या गुर्दे

सिद्ध किया हुआ

उपरोक्त अस्तित्व के साथ संयुक्त कैंडिडा एसपीपी।रक्त से यकृत, प्लीहा या गुर्दे के घाव, प्लीहा या गुर्दे के घाव के लक्षण या सांस्कृतिक, फोसी से बायोप्सी सामग्री में कैंडिडायलिसिस के हिस्टोलॉजिकल संकेतों के साथ

फंगल संक्रमण के वी। पथ

फंगल संक्रमण और उनके कार्यकर्ता एजेंटों को वर्गीकृत करने के लिए विभिन्न सिद्धांत हैं। यह 5 मुख्य समूहों पर रोगजनक कवक को विभाजित करने के लिए लगभग सबसे आसान और उपयुक्त लगता है:

1. सतह mycoses के रोगजनकों;

2. त्वचीय रोगजनन;

3. subcutaneous mycosis के रोगजनकों;

4. गहरे mycoses के रोगजनकों (प्राथमिक रोगजनक microomycetes, अवसरवादी संक्रमण के कारक एजेंट)।

5. स्यूडोमिकोसिस रोगजनन।

* यह जोर दिया जाना चाहिए कि immunosuppressed रोगियों में पहले तीन समूहों के रोगजनकों Funkmia और पॉलीओर्गन घावों का कारण हो सकता है।

निम्नलिखित खंडों में माइकोस के कारक एजेंटों का वर्णन, हम एक ही योजना में देते हैं: अपना नाम अपनाया गया नामकरण के अनुसार, समानार्थी की एक सूची, पोषक तत्व मीडिया पर उपनिवेशों की एक मैक्रोस्कोपिक विशेषता और के तत्वों की सूक्ष्म विशेषता मूल तैयारी और उपनिवेशों से एक माइक्रोस्कोप के नीचे कवक दिखाई देता है। प्रकृति में मशरूम के वितरण पर डेटा भी दिया जाता है और उनके कारण बीमारी भी सूचीबद्ध होती है।

आंकड़ों के मुताबिक, एक तरह से हमारे देश की आबादी का लगभग 20% या दूसरा माइकोसिस से पीड़ित है। लेकिन उनमें से सभी को पेशेवर मदद के लिए इलाज नहीं किया जाता है। कारणों में से एक यह है कि लोग बस इस बीमारी के सभी लक्षणों और अभिव्यक्तियों को नहीं जानते हैं।

मिकोसा के लक्षण

सबसे पहले, यह ध्यान देने योग्य है कि - यह किसी प्रकार की एक निश्चित बीमारी नहीं है, बल्कि त्वचा के विभिन्न फंगल घावों और उसके परिशिष्टों का एक समूह नहीं है। इसलिए, लक्षण काफी विविध हो सकते हैं, लेकिन अक्सर निम्नानुसार नोट किया गया है:

त्वचा पर छीलने वाले स्पॉट की उपस्थिति। अक्सर, वे त्वचा स्टॉप पर, पैरों की उंगलियों के बीच दिखाई देते हैं। अक्सर वे खुजली, जलन और भावनाओं की अन्य संवेदनाओं का कारण बनते हैं।
रंग और नाखून संरचना बदलें। वे पीले, नाजुक, टुकड़े टुकड़े और चलने बन जाते हैं, उनकी सतह छोटी गाड़ी और असमान हो सकती है।
त्वचा पर दरारें। अक्सर, त्वचा की त्वचा के फंगल घावों के साथ, यह अटक जाता है और बहुत दरार करना शुरू कर देता है।
बदबू। कई रोगी प्रभावित त्वचा की अप्रिय गंध के बारे में शिकायत करते हैं, खासकर जब पोप माइकोसिस होता है।

जब ऐसे संकेत प्रकट होते हैं, तो जितनी जल्दी हो सके त्वचा विशेषज्ञ से जाना आवश्यक है और यह निर्धारित करने के लिए पूर्ण निदान करें कि किस प्रकार के मिकोसा ने त्वचा को मारा।

माइकोस के निदान की पद्धतियां

जब रोगी त्वचा के फंगल घावों के विशिष्ट लक्षणों के साथ एक त्वचा विशेषज्ञ की ओर जाते हैं, तो अक्सर, डॉक्टर की प्रारंभिक बाहरी परीक्षा निदान करने के लिए पर्याप्त होती है। एकमात्र सवाल यह है कि किस प्रकार के मिकोसा ने त्वचा को मारा।

आगे की उपचार रणनीति निर्धारित करने के लिए यह जानकारी आवश्यक है। तरीकों के निदान के लिए, ऐसी तकनीकों को लागू किया जा सकता है:

लकड़ी के दीपक के नीचे अनुसंधान। पराबैंगनी प्रकाश का एक विशेष स्पेक्ट्रम आपको फंगल घावों की उपस्थिति निर्धारित करने की अनुमति देता है। यह विधि बहुत सरल और किफायती है, इसके साथ, आप न केवल निदान, बल्कि उपचार के पाठ्यक्रम को भी नियंत्रित कर सकते हैं। लेकिन यह मिकोसा के प्रकार को निर्धारित करने की अनुमति नहीं देता है।
माइक्रोस्कोपी। मिकोसा के निदान के सबसे सरल और सबसे आम तरीकों में से एक कवक कपड़ों द्वारा स्क्रैप किए गए माइक्रोस्कोप के तहत एक अध्ययन है। ऐसा करने के लिए, यह स्लाइड पर रखा गया है। दो प्रकार के दायरे अनुसंधान होते हैं: धुंधला पदार्थों का उपयोग करना और स्पष्टीकरण का उपयोग करना।
बैक्टीरियोलॉजिकल बुवाई। सबसे सटीक नैदानिक \u200b\u200bतरीकों में से एक पोषक तत्व मीडिया पर बुवाई का एक टैंक है। उपनिवेशों की उपस्थिति और विशेषता में, चिकित्सक रोगजनक के प्रकार को सेट कर सकते हैं। इस विधि का नुकसान अवधि है, कॉलोनी की खेती 2-3 सप्ताह के लिए आवश्यक हो सकती है। इसके अलावा, केवल आधे मामलों में परिणाम प्राप्त करना संभव है।
पीसीआर डायग्नोस्टिक्स। यह सबसे सटीक और आधुनिक नैदानिक \u200b\u200bतरीकों में से एक है, लेकिन माइक्रोज़ के प्रकार को निर्धारित करने के लिए कई विश्लेषण की आवश्यकता हो सकती है, जिसके लिए कुछ लागत की आवश्यकता होती है।

यह ध्यान देने योग्य है कि सबसे अधिक निर्धारित करने के लिए तरीकों का निदान आवश्यक है प्रभावी विधि इस बीमारी का इलाज। और यदि विशेष रूप से विशेषज्ञ की यात्रा करने की कोई संभावना नहीं है, तो आप उस सेवा का उपयोग कर सकते हैं जो हमारे क्लिनिक प्रदान करता है और

स्लाइड या बालों को स्लाइड पर रखा जाता है (ग्लास को घटाया जाना चाहिए) और कास्टिक या कास्टिक सोडा के 30% समाधान और कोटिंग ग्लास के साथ कवर की एक या दो-तीन बूंदें डालीं। 2-3 मिनट के लिए, दवा पर अल्कोहल बर्नर की लौ पर आसान हीटिंग पर, गठन से पहले कोटिंग ग्लास को थोड़ा दबाया
स्क्रैप का अध्ययन करते समय ग्रे बादल। बालों को नष्ट नहीं किया जाना चाहिए, वे केवल इस तरह के हीटिंग के साथ सूजन करते हैं। एक अंधेरे डायाफ्राम के साथ एक माइक्रोस्कोपिक अध्ययन (100-200 गुना की वृद्धि) के साथ, फंगल तत्वों का पता लगाया जाता है - विवाद या माईसेलियम के धागे। सूक्ष्मदर्शी अध्ययन की सफलता के लिए एक शर्त तराजू और बालों के खनन की पूरी तरह से है, जिसे एक विशेष चिमटी (बरौनी चिमटी) द्वारा प्रभावित foci से बंद किया जाना चाहिए। न केवल अच्छी तरह से दिखाई देने वाले बालों, क्रस्ट्स और तराजू के लिए ध्यान देना आवश्यक है, बल्कि बालों के छोटे ध्यान देने योग्य अवशेषों के लिए भी (तथाकथित हेमप्स) और काले बिंदुओं को स्केलपेल या हिस्टोलॉजिकल सुई द्वारा हटा दिए जाते हैं। इसे किसी भी रोगी को हार के स्थान पर संतुष्ट नहीं होना चाहिए, पूरी खोपड़ी की सावधानीपूर्वक जांच करना आवश्यक है।

बालों में, ट्रुडोडोफी से प्रभावित, विवाद कवक श्रृंखला स्थित हैं। माइक्रोस्पोरिया के साथ, विवाद एक रिज़र के मुकाबले बहुत छोटे होते हैं, चेन गुना नहीं होते हैं और बालों के बाहर स्थित होते हैं। बालों के अंदर सेप्टिक मायसेलियम से होता है। चतुर्थ विवाद के मामले में बालों को तैयार किया जाता है। पासमार्ट्स को पॉलिमॉर्फिक विवाद, मोटे विविध धागे और आमतौर पर एयर बुलबुले (चित्र 48) देखा जाता है।

उसी समय, कवक पूरी तरह से सभी बालों को प्रभावित नहीं करती है, लेकिन अप्रभावित क्षेत्रों को बनी हुई है।
चिकनी त्वचा के साथ सामग्री प्राप्त करने के लिए, स्क्रैपिंग स्क्रैप बनाते हैं। एक तेज चम्मच या स्केलपेल को नुकसान के परिधीय क्षेत्र। नाखूनों से स्क्रैपिंग एक तेज चिकित्सा चाकू (स्केलपेल) का उत्पादन करने, छोटे, लेकिन गहरे वर्गों को हटाने के लिए अधिक सुविधाजनक है आंतरिक सतह सींग का बुनाई प्लेटों के साथ एक चोल के आकार के पाउडर की नाखून प्लेट या स्क्रबिंग।
प्रारंभिक सामग्री को क्षार के साथ ट्यूब में उबलाया जाता है और फिर 12-20 तक इस घड़ी ट्यूब में खड़े होने के लिए छोड़ दिया जाता है।
उसके बाद, सामग्री centrifuged हैं और माइक्रोस्कोप (विधि एन ए चेरनोगुबोव) के तहत प्रक्षेपण की जांच की जाती है।
कवक कृत्रिम पोषक तत्व मीडिया पर अच्छी तरह से उगाया जाता है जिसमें कार्बोहाइड्रेट और प्रोटीन प्रकृति के पदार्थ होते हैं। तथाकथित मूल saburo पर्यावरण, बियर wort, agar और सब्जियां विशेष रूप से आम हैं।

फंगल रोगों का प्रयोगशाला निदान मशरूम का पता लगाने और इसकी तरह और प्रकार के निर्धारण पर आधारित है। इसमें दो मुख्य चरण होते हैं: सूक्ष्म और सांस्कृतिक अध्ययन।

सूक्ष्मदर्शी द्वारा परीक्षण

माइक्रोस्कोपिक परीक्षा पहला और महत्वपूर्ण लिंक है जो आपको प्रारंभिक निदान की पुष्टि करने की अनुमति देता है।

एक माइक्रोस्कोपिक अध्ययन की सफलता पैथोलॉजिकल सामग्री की उचित बाड़ पर काफी हद तक निर्भर करती है। एक सूक्ष्म अध्ययन के लिए, घाव मशरूम (सुस्त, टूटा हुआ, मोटा हुआ) के अनंत के संकेतों को चुनना आवश्यक है। उपस्थिति के लिए बदल गया बाल epilatory चिमटी को हटा दें। माइक्रोस्पोरिया के साथ एकल आश्चर्यजनक बाल का पता लगाने के लिए, आप एक लकड़ी के फिल्टर (हरे रंग की नीली चमक) के साथ एक फ्लोरोसेंट दीपक का उपयोग कर सकते हैं।

चकित बालों के चयन में, आप कई अतिरिक्त सुविधाओं का उपयोग कर सकते हैं। बेस पर, माइक्रोस्पोरम्स द्वारा हिट हार्ट, पोशाक विवाद का एक ग्रे मामला है। तराजू की मोटाई में क्रोनिक ट्रिप्रोफाइड में, लघु ग्रे "अल्पविराम" और "प्रश्न पूछने वाले संकेत" प्रभावित बालों के रूप में घुमावदार होते हैं, साथ ही "ब्लैक डॉट्स" (मोटे काले, कूप के मुंह में पैदा हुए काले रंग) । एक माइक्रोस्कोपिक अध्ययन के लिए घुसपैठ-अभिमानी त्रिवर्तनिक्स के साथ, प्रभावित बालों को छोड़कर, आप घाव फोकस से पुस और क्रस्ट का उपयोग कर सकते हैं।

माइक्रोस्पोरिया के दौरान त्वचा के घाव के foci से, tricochy और फ्लेक्स के वोनिकल folds के mycosis, घाव के परिधीय क्षेत्र से स्क्रैप करना आवश्यक है, जहां कवक अधिक है। त्वचा के तराजू के साथ बालों को खरोंच करना।

माइक्रोस्पोरिया और ट्राइकोची के दौरान एक चकित बालों के अध्ययन में, विवाद की व्यवस्था (बालों के अंदर या बाहर) और उनकी परिमाण की व्यवस्था की विशिष्टताओं के लिए ध्यान खींचा जाता है। ये आंकड़े कुछ मामलों में निदान, मिकोसिस और महामारी विज्ञान के नैदानिक \u200b\u200bरूप को स्पष्ट करने की अनुमति देते हैं।

माइक्रोस्कोपिक रिसर्च के लिए मिकोसा स्टॉप के इंटरफेस फॉर्म के साथ मैकरी-रॉग परत के त्वचा के फ्लेक्स और टुकड़े का उपयोग करता है। माइक्रोस्कोपिक परीक्षा के लिए ली जाने वाली नाखून अनुभाग Onychomicosis के रूप में निर्भर करता है। सतही रूप के साथ, आपको नाखून प्लेट की सतह से स्क्रैपिंग करने की आवश्यकता है।

सबसे लगातार डिस्टल-पार्श्व रूप के साथ, एक नाखून बिस्तर से स्क्रैपिंग, प्लेट (सबनंबर हाइपरकेरेटोसिस) के नीचे से एक कटौती की नाखून प्लेट के साथ। सामग्री की बाड़ के लिए निकटवर्ती सबकास्ट रूप के साथ, विशेष तरीकों का उपयोग किया जाता है (बोर्मर, नाखून बायोप्सी के साथ ड्रिल खिड़कियां)।

प्लांटार सतह से स्क्रैपिंग मिकोसा स्टॉप स्केल के स्क्वैमस-हाइपरकेरेटिक रूप के साथ। मिकोस के निर्वहन रूप के साथ, बुलबुले टायर अध्ययन के लिए कटौती कर रहे हैं।

माइक्रोस्कोपिक हेयर रिसर्च के लिए सामग्री तैयारी उपकरण । कॉन के 30% की एक छोटी बूंद और अनुमानित बाल ग्लास के सतह ग्लास और वैकिन सुई पर रखी जाती है। अल्काली ड्रॉप के किनारे क्रिस्टल की रिम की सतह से ऊपर दिखाई देने तक शराब की लौ पर एक बाल बूंद थोड़ा गर्म हो जाती है। कवर ग्लास को कवर करने के बाद, अतिरिक्त क्षार फ़िल्टर पेपर द्वारा हटा दिया जाता है। दवा को पहले छोटे से जांच की जाती है, और फिर माइक्रोस्कोप में एक बड़े (x 400) में वृद्धि होती है।

त्वचा और नाखून के तराजू । माइक्रोस्कोपिक अध्ययनों के लिए पतली नाखून के गुच्छे को 30% कॉन की बूंद में एक स्लाइड पर रखा जाता है और वाष्पीकरण के दौरान क्षार जोड़कर गरम किया जाता है। ठंडा unwrapped दवा कोटिंग ग्लास और माइक्रोस्कोपी के साथ कवर किया गया है।

मोटी त्वचा और नाखून के गुच्छे को एक अपकेंद्रित्र ट्यूब में रखा जाता है और 30% कॉन की कई बूंदों के साथ डाला जाता है। ट्यूब को उबालने के लिए गर्म किया जाता है और 20-30 मिनट तक छोड़ दिया जाता है। ग्लास स्टिक के साथ नरम सामग्री का एक टुकड़ा स्लाइड में स्थानांतरित किया जाता है, "क्लाउड" की उपस्थिति से पहले मैच दबाया जाता है, जिसके बाद माइक्रोस्कोपी।

मवाद । पुस ड्रॉप को ग्लिसरीन के साथ आधे में शराब की बूंद के साथ मिलाया जाता है और इसकी देशी तैयारी में जांच की जाती है।

सांस्कृतिक निदान

निदान के अंतिम स्पष्टीकरण और महामारी विज्ञान को स्पष्ट करने के लिए सांस्कृतिक निदान किया जाता है। इसमें बाद की माइक्रोस्कोपिक परीक्षा के साथ मशरूम संस्कृति का उत्पादन शामिल है।

आश्चर्यजनक बाल, तराजू (त्वचा और नाखून), बुलबुले टायर या बिल्ली एक कृत्रिम पोषक माध्यम पर गिरते हैं। पेट्री व्यंजनों पर विशाल उपनिवेशों की उपस्थिति में, आप रोगजनक (माइक्रोस्पोरम, ट्राइचोफोस्टन, एपिडर्मोफोनीटन) के तरीके का एक विचार कर सकते हैं, इसका रूप (एल। कैनिस या फेरुगिनम, टी। वायलसुम, वेरुकोसम या जिप्सम)। जीनस और कवक के प्रकार का अंतिम परिष्करण केवल प्राप्त संस्कृति के एक माइक्रोस्कोपिक अध्ययन के आधार पर संभव है।

सतह कैंडिडिआसिस के प्रयोगशाला निदान

के लिये प्रयोगशाला अनुसंधान खमीर जैसी मशरूम पर ताजा सामग्री की आवश्यकता होती है। माइक्रोस्कोपिक अनुसंधान के लिए, के आधार पर नैदानिक \u200b\u200bअभिव्यक्तियाँ और घावों का स्थानीयकरण, त्वचा के तराजू लिया जा सकता है, नाखून से स्क्रैप, नाखून रोलर के नीचे से पुस की एक बूंद, मुंह के श्लेष्म झिल्ली के प्रभावित क्षेत्रों से छापे और बाहरी जननांग अंग, योनि की दीवारें, मूत्रमार्ग के श्लेष्म झिल्ली से स्क्रैपिंग, साथ ही एक लाल सीमा होंठों के साथ वेश्या, बड़े और छोटे फोल्ड की त्वचा के प्रभावित क्षेत्रों।

हार के स्थान और नैदानिक \u200b\u200bअभिव्यक्तियों की प्रकृति के आधार पर, अध्ययन के लिए सामग्री एक सूती तलछट, स्केलपेल, लूप इत्यादि द्वारा ली जाती है। त्वचा और नाखून के फ्लेक्स, एपिडर्मिस के स्क्रैप और श्लेष्म झिल्ली के ढलानों का पूर्व-उपचार किया जाता है 30% कॉन के साथ। रोगजनक सामग्री की अनपेक्षित या चित्रित दवाओं में जांच की जाती है।

पहले मामले में, सामग्री ग्लिसरीन के साथ समान मात्रा में शराब के साथ मिश्रित होती है। जब ग्राम, खमीर कोशिकाओं और स्यूडोमायटेलिन के मामले में पेंटिंग डार्क बैंगनी दिखती है, सिलू-नील्सन - ब्लू, और रोमनोव्स्की-जिम पर - गुलाबी-बैंगनी पर। साथ ही, खमीर सेल की विशिष्ट विशेषता मजाक कर रही है - "घंटे का चश्मा" के आकार की खोज। ओरल गुहा, जननांग अंगों के श्लेष्म झिल्ली से सामग्री लेना, होंठ की लाल सीमा की त्वचा से, मुंह के कोणों से, बड़े और छोटे गुना की त्वचा से एक बाँझ टैम्पन के साथ किया जाता है। सामग्री लेने के बाद टैम्पन तरल wort के साथ एक और बाँझ ट्यूब में रखा गया है। एक टैम्पन के साथ टेस्ट ट्यूब को माइक्रोबायोलॉजिकल प्रयोगशाला में भेजा जाता है। जीनस कैंडिडा के खमीर की तरह मशरूम की शुद्ध संस्कृति की रिहाई आम तौर पर स्वीकृत माइक्रोबायोलॉजिकल तकनीक के अनुसार की जाती है।

माइक्रोस्कोपी -यह MyCoses के प्रयोगशाला निदान में मुख्य तरीकों में से एक है। इस दिन से इस अध्ययन का संचालन करना आवश्यक है जब पहली उपनिवेश पोषक माध्यम पर दिखाई देते हैं। सूक्ष्म परीक्षा से पहले, उपनिवेशों की उपस्थिति में, खमीर या मोल्ड के साथ मशरूम जानना जरूरी है - बीजिंग नमूने के परिणाम।

मोल्ड फंगी की माइक्रोस्कोपी में, माइक्रोलेस की संरचना (यानी, जीआईएफ संरचना की विशेषताएं, उनके रंग, सेप्टिसिटी; शंकुधारी और विवाद की संरचना की विशेषताएं, आकार, आकार, conidia के रंग सहित; उनकी सेल दीवार, सेप्टिसिटी की संरचना , आदि।)

माइक्रोस्कोपी के लिए तैयार देशी तथा चित्रिततैयारी। खाना पकाने के लिए चित्रित तैयारी सामग्री का इलाज विभिन्न तरीकों से किया जाता है:

1. रंगPAS।मोड।पीएएस विधि का उपयोग आपको सूक्ष्मजीवों की दीवारों में तटस्थ polysaccharides की पहचान करने की अनुमति देता है। तटस्थ polysaccharides एक ग्लुकन-मन्नाना परिसर हैं, जो कि अधिकांश eumestets की सेल दीवार में है, इसके कारण और धुंधला होता है।

PAS।-Ract - फंगल संक्रमण के ऊतक के रूपों के सूक्ष्म निदान के तरीकों में से एक। व्यावहारिक प्रयोगशालाओं में, इस विधि के विभिन्न संशोधनों का उपयोग माइक्रोस्कोपिक डायग्नोस्टिक्स के लिए किया जाता है: क्रोमियम ऑक्सीकरण - बाउर प्रतिक्रिया; ग्रिडली में रंग।

2. ग्राम विधि (ग्राम-रायगर द्वारा संशोधन) के अनुसार सूक्ष्मजीवों की पहचान करने के लिए रंग।

3. एसिड प्रतिरोधी सूक्ष्मजीवों की पहचान करने के लिए Tsil-Nilson में रंग। यदि अध्ययन के तहत सामग्री तरलइससे वे प्रबुद्ध तरल पदार्थ में माइक्रोस्कोपी के लिए एक अनपेक्षित धुंध तैयार करते हैं: 1: 1 के अनुपात में ग्लिसरीन के साथ अल्कोहल का मिश्रण।

अगला चरण एक जादुई अध्ययन है।- मशरूम की आवंटन और पहचान। अध्ययन के तहत सामग्री के आधार पर इस चरण की विशेषताओं पर विचार करें।

सूक्ष्म अनुसंधान

सांस्कृतिक अनुसंधान।सांस्कृतिक अनुसंधान अध्ययन के तहत सामग्री से रोगजनक के चयन पर आधारित है। विभिन्न प्रकार के मशरूम (2-4 दिनों से 4 सप्ताह तक) के लिए खेती की समय सीमा अलग-अलग होती है, संदिग्ध द्विषित मशरूम के साथ, संस्कृति को 8 सप्ताह तक अलग किया जाता है। सूक्ष्म प्रयोगशाला में खेती के लिए मुख्य मीडिया SABURO पर्यावरण है: डेक्सटोरस agar saburo (घने माध्यम), सबुरो शोरबा (तरल माध्यम)। बैक्टीरियल फ्लोरा, एंटीबायोटिक्स (क्लोरैम्फेनिक, gentamicin, कम अक्सर streptomycin, penicillin) के विकास को दबाने के लिए Saburo माध्यम में जोड़ा जाता है। सैप्रोफाइट मशरूम, साइक्लोहेक्सिमाइड, क्लोरैम्फेनिकोल की वृद्धि को दबाने के लिए, माध्यम में जोड़ा जाता है। Cycloheximide के साथ तैयार मीडिया हैं ( Mycobiotic। मायकोसेल).

अधिकांश रोगजनक कवक के लिए इष्टतम खेती व्यवस्था 30 0 सी, 20-25 0 एस है, कम बार 37 0 एस - संदिग्ध द्विषित मशरूम के साथ। अधिकांश मशरूम के लिए ऊष्मायन अवधि 6 सप्ताह तक है; यदि इस विकास के समय के बाद नहीं देखा जाता है, तो नकारात्मक उत्तर दें। 6 सप्ताह के लिए विकास की अनुपस्थिति में द्विध्रुवीय माइक्रोबोसिस के संदेह के मामले में, संस्कृति 8 सप्ताह का सामना कर रही है और केवल इसके बाद ही नकारात्मक परिणाम देती है।

एक संस्कृति अध्ययन के साथ नैदानिक \u200b\u200bरूप से महत्वपूर्णहैं:

सामग्री के मानदंड में बाँझ का अध्ययन करते समय, मोल्ड या खमीर मशरूम का चयन;

द्विमूर्ण मशरूम का अलगाव।

माइक्रिकल रिसर्च के एल्गोरिदम

1. रोगजनक (माइक्रोस्कोपी) के फंगल ईटियोलॉजी को परिभाषित करना।

2. खमीर मशरूम या मोल्ड निर्धारित करें:

नैदानिक \u200b\u200bसामग्री की माइक्रोस्कोपी (माइकल्स की उपस्थिति);

पोषक तत्व के माध्यम से उपनिवेशों की प्रकृति, विकास दर (खमीर मशरूम 48 घंटे बढ़ते हैं, मोल्ड मशरूम धीरे-धीरे बढ़ते हैं)।

3. बायोकेमिकल परीक्षणों का उपयोग करके (अंतःविषय) के स्तर तक मशरूम की अंतिम पहचान की जाती है इम्यूनोलॉजिकल विधियों। जैव रासायनिक गुणों के अध्ययन में, चयनित संस्कृति को आकलन करने की क्षमता (ऑक्सनोग्राम) और किण्वन (ज़िगोग्राम) का अध्ययन किया जाता है। स्वचालित पहचान प्रणाली (मशरूम की पहचान करने के लिए परीक्षण प्रणाली) का उपयोग करना संभव है।

सशर्त रोगजनक कवक के आवंटन के ईटियोलॉजिकल महत्व के मानदंड

1. मूल तैयारी में, केवल ब्लास्टोस्पोडा (सैप्रोफिस्टिक वनस्पति) दिखाई दे रहा है (कट्टरपंथी वनस्पति), फिर इसे गाड़ी के रूप में माना जाता है।

3. यदि ब्लास्टोस्पोर्स एकल और प्रचलित स्यूडोमाइटलाइन हैं, तो यह गहरे अंग घावों का संकेत है।

4. सक्रिय विजय ब्लास्टपुर - तीव्र प्रक्रिया का सबूत।

5. संबंधित परिणाम मूल्यांकन - प्रजनन से मशरूम का आवंटन

10 -फैक, मूत्र;

10 - स्पुतम।

6. एक और एक के नमूने की यहता

7. समर्पित तनाव के लिए एंटीबॉडी की उपस्थिति।

पृथक श्लेष्म का सूक्ष्म अध्ययन

1. सामग्री की तैयारी।श्लेष्म टैम्पन से सामग्री की बाड़ के बाद सबको या वॉर्ट-अग्रर, या एमपीबी के तरल माध्यम के 2 मिलीलीटर में रखा गया है, जो बाँझ परीक्षण ट्यूबों में फैला हुआ है। वे कॉर्क को डुबोने की कोशिश नहीं कर रहे हैं, वे 5 मिनट के लिए पूरी तरह से हिल गए हैं। प्राप्त निलंबन से कई dilutions तैयार करें 1:10 और 1: 100, आदि

प्रत्येक कमजोर पड़ने से, 2 कप सस्लो-अग्रर, आगरा सबुरो या एमपीए पर 0.1 मिलीलीटर। घने मीडिया पर बुवाई और समृद्धि के लिए एक टैम्पन के साथ एक ट्यूब के साथ एक ट्यूब 48 घंटे के लिए +37 0 एस पर सेते हैं:

अतीत के बाद, फसलों को उपनिवेशों की संख्या को देखा और गणना की जाती है और लगभग खमीर उपनिवेशों की संख्या निर्धारित की जाती है। उनका नंबर 20 से गुणा किया जाता है और प्रजनन के लिए जो इसे बनाया जाता है;

यदि विकास कप पर कोई वृद्धि नहीं हुई है, तो एक वोर्ट agar के साथ समृद्धि माध्यम से एक कप में दोहराया जाता है।

रक्त की सूक्ष्म परीक्षा

1. सामग्री की तैयारी।रक्त बाड़ के बाद, यह 1:10 पैदा हुआ है, ताकि रक्त की जीवाणुनाशक गुण मशरूम के विकास को बाधित न करें।

2. सांस्कृतिक अनुसंधान।

5-10 मिलीलीटर रक्त में 2% ग्लूकोज के साथ सबुरो तरल माध्यम के 50-100 मिलीलीटर में बोया गया। 37 0 के तापमान पर, वे सप्ताह के दौरान ऊष्मायन होते हैं;

5 दिनों के बाद, वे नियंत्रण बुवाई करते हैं। इसके लिए, एक बाँझ पिपेट वॉर्ट-अग्रर पर एक विंदुक समिंग से 3-4 बूंदों को छोड़ देता है और बाँझ बैक्टीरियोलॉजिकल लूप्स रगड़ता है;

2-5 दिनों के लिए बीजित कप थर्मोस्टेट में 37 0 एस पर रखा जाता है;

यदि विकास का पता चला है, तो फनीगिया के बारे में प्रारंभिक उत्तर दें, और अध्ययन के दौरान कवक की और पहचान की गई है।

बायोपेटैट्स के माइक्रोोलॉजिकल रिसर्च

1. सामग्री की बाड़ के लिए प्रिंट विधि का उपयोग करें।

2. सांस्कृतिक अनुसंधान:

घने पोषक तत्व saburo की सतह पर कपड़े के एक परीक्षण टुकड़े द्वारा एक छाप बनाओ;

कपड़े का एक ही टुकड़ा तरल पोषक तत्व माध्यम (वॉर्ट या सबुरो) के 50 मिलीलीटर में रखा जाता है;

सेविंग्स को 5 दिनों के लिए 37 0 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है।